Tá trealamh ELISA bunaithe ar phas soladach lipéadú antaigin nó antashubstainte agus einsíme ar antaigin nó ar antashubstaint. Coinníonn an antigen nó antasubstaint atá ceangailte le dromchla an iompróra soladach a ghníomhaíocht imdhíoneolaíoch fós, agus coinníonn an einsím lipéadaithe antaigin nó antasubstaint a ghníomhaíocht imdhíoneolaíoch agus an ghníomhaíocht einsíme araon. Ag tráth an chinnidh, imoibríonn an t-eiseamal atá faoi thástáil (ina ndéantar an antashubstaint nó an antigen) leis an antigen nó leis an antasubstaint ar dhromchla an iompróra soladach. Déantar an coimpléasc antigen-antasubstaint a fhoirmítear ar an iompróir soladach a scaradh ó shubstaintí eile sa leacht trí níocháin.
Cuirtear antaiginí nó antasubstaintí lipéadaithe einsím leis, a cheanglaíonn an t-iompróir soladach trí imoibriú freisin. Ag an am seo, tá méid na heinsíme sa chéim soladach i gcomhréir le méid na substainte san eiseamal. Tar éis an tsubstráit imoibriúcháin einsím a chur leis, déantar an tsubstráit a chatalú ag an einsím chun bheith ina tháirgí daite. Baineann méid an táirge go díreach le méid na substainte a tástáladh san eiseamal, agus mar sin is féidir anailís cháilíochtúil nó chainníochtúil a dhéanamh de réir doimhneacht an dath.
Méadaíonn éifeachtacht ard catalaíoch na n-einsímí go hindíreach torthaí na freagartha imdhíonachta, rud a fhágann go bhfuil an measúnú an-íogair. Is féidir ELISA a úsáid chun antaiginí a chinneadh, ach is féidir é a úsáid freisin chun antasubstaintí a chinneadh.
Bunphrionsabail threalamh ELISA
Úsáideann sé imoibriú sonrach antaigin agus antashubstainte chun an réad a nascadh le heinsím, agus ansin táirgeann sé imoibriú datha idir einsím agus tsubstráit le haghaidh cinneadh cainníochtúil. Is féidir leis an ábhar tomhais a bheith antashubstainte nó antigen.
Tá trí imoibrí riachtanach sa mhodh cinnidh seo:
â Antaigin nó antashubstaint phas soladach (asaithe imdhíonachta)
â¡ Einsím lipéadaithe antaigin nó antashubstaint (marcóir)
⢠tsubstráit le haghaidh gníomhaíochta einsíme (gníomhaire forbartha datha)
Sa tomhas, tá an antigen (antasubstainte) ceangailte leis an iompróir soladach ar dtús, ach coinníonn sé a ghníomhaíocht imdhíonachta fós, agus ansin cuirtear comhchuingeach (marcóir) antasubstainte (antigen) agus einsím leis, rud a choinníonn a ghníomhaíocht imdhíonachta bunaidh agus einsím fós. ghníomhaíocht. Nuair a imoibríonn an comhchuingeach leis an antigen (antasubstainte) ar an iompróir soladach, cuirtear an tsubstráit chomhfhreagrach den einsím leis. Is é sin, hidrealú catalaíoch nó imoibriú REDOX agus dath.
Tá an scáth datha a tháirgeann sé comhréireach leis an méid antaigin (antasubstainte) atá le tomhas. Is féidir leis an tsúil naked an táirge daite seo a urramú, is féidir micreascóp optúil, micreascóp leictreon, a thomhas freisin trí speictreafótaiméadar (ionstraim lipéad einsím). Tá an modh simplí, áisiúil, tapa agus sonrach.