Cén fáth a ndéantar tomhaltáin PCR de PP go ginearálta?

"Mar is eol dúinn go léir, is modh bunúsach turgnamhach é PCR i saotharlanna bithcheimiceacha." Tá na torthaí turgnamhacha míshásúil i gcónaí, rud a d'fhéadfadh a bheith mar gheall ar éilliú beag ar ábhair inchaite plaisteach PCR, nó cur isteach turgnamhach de bharr tabhairt isteach coscairí. Tá cúis an-tábhachtach eile ann: Beidh tionchar mór ag roghnú míchuí earraí inchaite ar thorthaí an turgnaimh freisin.

Tá go leor cúiseanna ann a théann i bhfeidhm ar thorthaí turgnaimh PCR: de ghnáth tá na 7 gcineál seo a leanas.

1. Primers: Is iad primers an eochair d'imoibriú sonrach PCR, agus braitheann sainiúlacht táirgí PCR ar an méid comhlántachta idir na primers agus an teimpléad DNA;

2. Einsím agus a thiúchan;

3. Cáilíocht agus tiúchan dNTP;

4. Teimpléad (géine sprice) aigéad núicléach;

5. Mg2+ tiúchan;

6. Teocht agus am a shocrú;

7. Líon na dtimthriallta;

8. Trealamh, earraí inchaite, etc.

I measc na bhfachtóirí iomadúla a mbíonn tionchar acu, tá tomhaltáin ar cheann de na fachtóirí an-tábhachtach agus is furasta a ndearctar orthu.

Tá go leor cineálacha deearraí inchaite PCR: 8-feadáin, feadáin íseal-toirte, feadáin caighdeánach, neamh-skirted, leath-skirted, lán-skirted, agus sraith de PCR agus plátaí qPCR. Tá sé an-deacair a roghnú, agus tá go leor fadhbanna Coiteann, a ligean ar ghlacadh le breathnú ar na fadhbanna a roghnaíonn gach duineearraí inchaite PCR, agus conas iad a réiteach?

Cén fáth a bhfuilearraí inchaite PCRgo ginearálta déanta as PP?

Freagra: Go ginearálta déantar earraí inchaite PCR / qPCR de pholapróipiléine (PP), toisc gur ábhar támh bitheolaíoch é, níl an dromchla éasca le cloí le bithmhóilíní, agus tá friotaíocht maith ceimiceach agus caoinfhulaingt teochta aige (is féidir é a uathchlátáil ag 121 céim) baictéir agus is féidir leis athruithe teochta a sheasamh le linn rothaíochta teirmeach). De ghnáth bíonn na hábhair seo i dteagmháil dhíreach le himoibrithe nó samplaí, agus mar sin ní mór ábhair ardchaighdeáin agus teicnící próiseála maith a roghnú le linn an phróisis táirgthe agus ullmhúcháin.